新婚夜被强伦轩视频,成年人视频男人的网站,国产精品免费AⅤ片在线观看男女,国产精品三级?v及在线观看

07月03 “逆向思維”——良性病變組織NGS研究高分文章解析

習(xí)慣了正向思維不如來(lái)個(gè)反向思維；

???????????????????????????????????惡性癌組織研究多了不如研究下良性病變組織

文獻(xiàn)：Ye L, Zhou X, Huang F, et al. The genetic landscape of benign thyroid nodules revealed by whole exome and transcriptome sequencing[J]. Nature Communications, 2017, 8.

?研究背景：

乳頭狀甲狀腺癌（papillary thyroid carcinoma，PTC）：是最常見(jiàn)的甲狀腺癌，其發(fā)病率約占甲狀腺癌發(fā)病率的70-80%， 每10萬(wàn)人中有5.7個(gè)人患有PTC，女性約為8.8人，男性約為2.7人，屬于低度惡性腫瘤，分化程度高，預(yù)后良好。甲狀腺癌發(fā)病的第一癥狀是在頸部的甲狀腺區(qū)出現(xiàn)結(jié)節(jié)，結(jié)節(jié)常為無(wú)痛性，甲狀腺結(jié)節(jié)發(fā)生率很高，這些結(jié)節(jié)中約有5%的結(jié)節(jié)可能會(huì)出現(xiàn)癌變。已經(jīng)有諸如TCGA等研究機(jī)構(gòu)對(duì)PTC的腫瘤相關(guān)變異進(jìn)行了鑒定（BRAF和RAS基因突變等），但是對(duì)于良性結(jié)節(jié)的基因組特征所知甚少。良性增生性甲狀腺結(jié)節(jié)，尤其是腺瘤樣結(jié)節(jié)，尚未研究過(guò)。

新穎點(diǎn)/研究目的：1.甲狀腺癌組織研究的很多，良性結(jié)節(jié)的遺傳和表達(dá)景觀如何？

• 傳統(tǒng)認(rèn)為PTC和良性結(jié)節(jié)具有獨(dú)立起源，是否可以提供基因組層面證據(jù)？
• 傳統(tǒng)的基因檢測(cè)技術(shù)通過(guò)檢測(cè)惡性癌組織相關(guān)突變標(biāo)志提供納入標(biāo)準(zhǔn)（rule-in）輔助診斷，是否可以鑒定良性組織相關(guān)突變標(biāo)志提供排除標(biāo)準(zhǔn)（rule-out）？

實(shí)驗(yàn)材料：共計(jì)28例患者的經(jīng)過(guò)手術(shù)獲得的127個(gè)樣本的癌組織（PTC）或結(jié)節(jié)組織、正常組織及配對(duì)的germline外周血液樣本?；颊吒鶕?jù)有無(wú)PTC癌組織分成2組，TB和SB（只有良性結(jié)節(jié)，且持續(xù)2年）。

研究結(jié)果：

1.良性腺瘤樣甲狀腺結(jié)節(jié)相比于乳頭狀甲狀腺癌具有獨(dú)特的變異

外顯子組測(cè)序（平均161X）結(jié)果顯示，相比于外周血，在正常組織、良性結(jié)節(jié)組織和乳頭狀甲狀腺癌組織中共計(jì)檢測(cè)到了528個(gè)基因中的688個(gè)體細(xì)胞突變，腫瘤組織和結(jié)節(jié)組織中體細(xì)胞突變數(shù)目（/Mb）明顯高于正常組織，但腫瘤組織和結(jié)節(jié)組織的突變特征（6種類(lèi)型的堿基替換及其上下文）卻明顯不同。

經(jīng)過(guò)高頻突變基因（significantly mutated genes,SMGs）分析，乳頭狀甲狀腺癌中以BRAF突變?yōu)橹鳎?0%樣本中攜帶），最主要的是BRAFV600E突變，這與TCGA的研究是一致的。而良性結(jié)節(jié)（TB和SB兩組）組織中與癌組織中完全不同，檢測(cè)到了互相排斥的ZNF148 (21.4%)、SPOP (14.3%) 和EZH1 (10.7%)。

 

高頻突變基因頻譜

 

在額外的231例良性結(jié)節(jié)中對(duì)上述三個(gè)基因中主要的體細(xì)胞突變進(jìn)行了驗(yàn)證，ZNF148基因突變頻率有所下降（5.4%），其他2個(gè)基因突變保持相似水平（SPOP P94R 11.2%，EZH1 Q571R 9.3%）。55例濾泡狀甲狀腺癌（follicular thyroid carcinomas，F(xiàn)TC）中未檢測(cè)到上述3個(gè)基因突變，表明特異存在于良性結(jié)節(jié)中。

SPOP，EZH1和ZNF148體細(xì)胞突變示意圖

利用人正常甲狀腺細(xì)胞系Nthy，構(gòu)建突變體進(jìn)行功能實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，EZH1 Q571R突變細(xì)胞系相比于野生型細(xì)胞系，細(xì)胞增殖能力輕微增加，侵襲能力降低。EZH1體細(xì)胞突變可能是甲狀腺腫的早期刺激因素之一。

細(xì)胞增殖和侵襲實(shí)驗(yàn)

對(duì)外顯子數(shù)據(jù)進(jìn)行CNV分析，只在癌組織中檢測(cè)到了已知的PTC相關(guān)的22號(hào)染色體長(zhǎng)臂arm水平拷貝數(shù)缺失，而良性結(jié)節(jié)中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)重現(xiàn)性的CNV。轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析后，也沒(méi)有發(fā)現(xiàn)重現(xiàn)性或者功能性的基因融合。

TB組來(lái)自相同PTC患者配對(duì)的癌組織和良性結(jié)節(jié)間相同的突變很少

PTC癌組織-良性結(jié)節(jié)pairs間的共有突變頻率展示

PTC癌組織和良性結(jié)節(jié)的重疊突變頻率最低（0-21.4％，中位數(shù)7.7％）。 當(dāng)考慮匹配的正常組織時(shí)，只有9個(gè)PTC癌組織和良性結(jié)節(jié)對(duì)顯示重疊的突變（1.7-7.4％）。共有突變少與純度沒(méi)有顯著相關(guān)性。TB組20個(gè)PTC患者的配對(duì)組織間體細(xì)胞突變變異等位基因頻率（variant allele frequency,VAF）進(jìn)行相關(guān)性分析，癌組織-良性結(jié)節(jié)間的相關(guān)性最差。

配對(duì)樣本間體細(xì)胞突變VAF相關(guān)性熱圖

良性結(jié)節(jié)與PTC癌組織間具有不同的基因表達(dá)模式

對(duì)9個(gè)患者（5個(gè)TB和4個(gè)SB）的26個(gè)組織進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序，相比于正常甲狀腺組織共計(jì)檢測(cè)到21441個(gè)差異表達(dá)基因，只有8％的上調(diào)和3.1％的下調(diào)基因在PTC和良性結(jié)節(jié)之間重疊。

差異表達(dá)基因Venn圖

經(jīng)過(guò)層次聚類(lèi)分析，惡性癌組織聚類(lèi)在一起，和良性結(jié)節(jié)/正常組織分開(kāi)，且TB和SB的良性結(jié)節(jié)組織聚類(lèi)在一起，表明二者間相似的功能。

差異表達(dá)基因?qū)哟尉垲?lèi)熱圖

采用3種已知的甲狀腺分化和信號(hào)傳導(dǎo)特征分類(lèi)器均發(fā)現(xiàn)良性結(jié)節(jié)和PTC癌組織明顯分離。3個(gè)分類(lèi)器分別為：甲狀腺分化評(píng)分（TDS，16個(gè)與甲狀腺代謝和功能相關(guān)的基因）、ERK活性評(píng)分（EAS，用于MEK / ERK活性測(cè)定的52個(gè)基因）和BRAF-RAS突變特征相關(guān)的71個(gè)基因集。

甲狀腺分化評(píng)分TDS和ERK活性評(píng)分熱圖

良性結(jié)節(jié)和PTC癌組織獨(dú)立進(jìn)化

對(duì)20名患者構(gòu)建了系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)，以說(shuō)明PTCs、良性結(jié)節(jié)和正常甲狀腺組織之間的進(jìn)化關(guān)系。大多數(shù)患者（15/20例）在良性結(jié)節(jié)和PTC之間早期即處于不同分支進(jìn)化，特別是在正常甲狀腺組織納入分析時(shí)，表明PTC癌組織與良性結(jié)節(jié)間早期分離和不同的進(jìn)化模式。

基于突變的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)

研究結(jié)論

本研究提供強(qiáng)有力的證據(jù)表明良性甲狀腺結(jié)節(jié)具有與PTC癌組織不同的遺傳和轉(zhuǎn)錄組景觀，證實(shí)了良性結(jié)節(jié)發(fā)育與PTC腫瘤形成不同。 良性甲狀腺結(jié)節(jié)不同于癌前病變，例如存在復(fù)發(fā)性BRAF突變的黑素細(xì)胞痣或具有惡性轉(zhuǎn)化風(fēng)險(xiǎn)的良性病變。作者認(rèn)為，將SPOP，ZNF148和EZH1作為良性結(jié)節(jié)相關(guān)基因的納入，通過(guò)提供“排除”信息，有可能提高基于DNA的突變檢測(cè)的診斷效能。在目前的甲狀腺分子診斷中添加良性相關(guān)突變標(biāo)志，從而提供“排除”信息，可能會(huì)增加其診斷功效。

 

這么詳細(xì)的文章解讀，不知道您有沒(méi)有g(shù)et到不一樣的研究思路呢？想獲得更多研究思路，歡迎撥打4006003186技術(shù)熱線，獲得更多研究思路。

立即體驗(yàn)